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宽分子量非变性电泳蛋白质Marker II(21-880 kD)
Broad MW Native Electrophoresis Protein Marker II(21-880 kD)
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名称 |
货号 |
规格 |
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宽分子量非变性电泳蛋白质Marker II(21-880 kD) |
RTD6136 |
20次(100 μl) |
●储存、运输及效期:
-20℃保存,湿冰运输,有效期为12个月。
● 产品简介:
本产品有5种蛋白组成,分子量范围为21-880 kD,经过非变性电泳后,用考马斯亮蓝染色后可以得到6条主带。
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蛋白名称 |
分子量(kD) |
蛋白来源 |
pI |
说明 |
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Ferritin |
440 880 |
equine spleen |
N/A |
非变性下440kD和880 kD |
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RC2 |
200 |
重组蛋白 |
6.7 |
单体蛋白分子量为75 kD,在Tris-甘氨酸非变性下表现为分子量~200 kD |
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RC1 |
75 |
重组蛋白 |
5.9 |
单体蛋白分子量为75 kD,在Tris-甘氨酸非变性下表现为分子量~75 kD,同时会形成少量二聚体(dimer) |
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Ovalbumin |
45 |
egg white |
5.2 |
球蛋白,分子量为45kD,非变性条件下大于45 kD会出现电荷异构体(charge isomer) |
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Trypsin Inhibitor |
21 |
Soybean |
4.5 |
非变性下21 kD |
● 使用说明:
1. 取出产品后,常温融化后,彻底混匀,上样电泳。
注:上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,1.0厚度10齿梳子加样孔上样5 μl,1.0厚度15齿梳子加样孔上样量2.5 μl,其他规格梳子请适当调整上样量。
2. 该产品不含蛋白凝胶制备试剂,您可以选择非变性PAGE凝胶制备及电泳试剂盒(货号:
RTD6130或RTD6135)。如自备试剂,经典Laemmli系统中把制胶溶液、电泳缓冲液和上样缓冲液中的SDS和还原剂(DTT或β-巯基乙醇)全部去除即可进行非变性电泳。
3. 电泳条件:
建议使用10%非变性胶或者4-15%梯度非变性胶(货号:RTD6117-0415)进行电泳。
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恒电压 |
120 V |
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起始电流 |
27-35 mA/板胶 |
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结束电流 |
7-10 mA/板胶 |
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电泳时间 |
1h20min+ |
4. 电泳结束后,考马斯亮蓝染色,观察结果。
注:使用银染染色时,由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法,需要适当降低Marker上样量,一般稀释50倍后上样。
注意:
1. 本蛋白Marker不适用于变性蛋白电泳(SDS-PAGE),因为在SDS存在下,含有多个亚单位的蛋白会不同程度解聚。
2. 在非变性条件下,蛋白的迁移与蛋白的电荷、蛋白形状以及蛋白分子量都有关,因此不能精确判断待测蛋白的分子量,只能粗略判断蛋白的大小。
● 实验示例:
1. 4-15%Tris-甘氨酸非变性胶

2. 8%Tris-甘氨酸非变性胶

3. 3-12% BlueNative

4. 4-16% BlueNative

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